紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)主要是由電源、光源、單色器、樣品室、光電轉(zhuǎn)換器、前置放大器、數(shù)據(jù)處理、外圍設(shè)備等部分組成。
光 源:指的是發(fā)光的物體。理想的光源應(yīng)能提供連續(xù)輻射,光的強(qiáng)度必須足夠大,并且在整個(gè)光譜區(qū)內(nèi)其強(qiáng)度不應(yīng)隨波長(zhǎng)有明顯變化。當(dāng)然理想的光源是不存在的,沒(méi)有那種光源能在所有波長(zhǎng)點(diǎn)提供足夠強(qiáng)大而且穩(wěn)定的光輻射。所以根據(jù)不同的波長(zhǎng),要采用不同的光源。
鎢燈:320-1100nm(可見(jiàn)區(qū))
氘燈:190- 400nm(紫外區(qū))
單 色器:是一種用來(lái)把來(lái)自光源的混合光分解為單色光并能隨意改變波長(zhǎng)的裝置。它主要有入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準(zhǔn)直鏡組成,其中色散元件是最關(guān)鍵的,因?yàn)樗馁|(zhì)量決定了單色器質(zhì)量的優(yōu)劣。
試 樣室:用來(lái)擱放測(cè)試樣品的一個(gè)暗盒裝置。
光電轉(zhuǎn)換器:把微弱的光信號(hào)轉(zhuǎn)變成微弱的電信號(hào)。能檢測(cè)通過(guò)測(cè)試溶液與參比溶液的光強(qiáng)度,并以電信號(hào)顯示出來(lái),用于體現(xiàn)測(cè)試溶液與參比溶液的光強(qiáng)度比值。通常紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)使用的檢測(cè)器有硅光電池、光電管和光電倍增管,今天由于半導(dǎo)體技術(shù)的迅速發(fā)展,光電池的性能越來(lái)越好,且光電倍增管的價(jià)格越來(lái)越低,所以光電管逐漸被淘汰了。
前置放大器:一般由高阻抗集成運(yùn)算放大器組成,完成微電流(電壓)的放大。
直流穩(wěn)壓電源:組成不同電壓(電流)的直流工作電源,滿足儀器各個(gè)負(fù)載需求。
顯 示器:LED、LCD電壓表組成。
分光光度計(jì)的理論依據(jù)是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又稱:朗伯-比爾定律。
就是利用物質(zhì)在光的照射激發(fā)下,具有選擇性吸收現(xiàn)象來(lái)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
I0:入射的單色光強(qiáng)度
T =I/I0×100% I:出射的單色光強(qiáng)度
T:透射比強(qiáng)度(透光率),用百分?jǐn)?shù)表示。
朗伯-比耳定律:A=KCL A=log1/T = -log T
A:吸光度(吸收比強(qiáng)度)
K:吸光系數(shù)
C:樣品的濃度(g/l)
L:比色皿的寬度(cm)
吸光度:當(dāng)一束平行的單色光,垂直照射在均勻的被測(cè)樣品時(shí),該樣品就有一定的吸收,樣品對(duì)入射光減弱吸收的程度,稱為吸光度,通過(guò)儀器便可測(cè)出,吸光度是沒(méi)單位的一個(gè)量。從以上公式中可以看出,當(dāng)入射光強(qiáng)度一定時(shí),物質(zhì)的吸光度與物質(zhì)中吸光物質(zhì)的濃度和物質(zhì)厚度的乘積成正比。
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